Nouvelle publication sur Nosema

Maldi BeeTyping to assess Nosema in Honeybee

English summary : We just published a new scientific article showing that MALDI‐MS is a rapid, cost‐effective and simple method for identifying Nosema species. We demonstrated that MALDI Biotyping could represent a valuable surveillance tool of nosemosis in apiaries for sanitary services and beekeepers.

Resumen en Castellano : Publicamos a un nuevo articulo sobre Nosema. Con un espectrometro de masa MALDI, conseguimos a reconocer las dos especies de Nosema (N.apis vs N.ceranae), calcular a la viabilidad de las spores.

Nous venons de publier un nouvel article scientifique sur la technique du Bee-Typing développée au laboratoire. Cette technique permet d'obtenir des profils moléculaires a partir de tissus de l'abeille ou de toute autre matrice. Nous nous sommes focalisés ici sur les spores de Nosema.

Actuellement, on sait reconnaître Nosema par microscopie, mais si l'on souhaite savoir s'il s'agit de Nosema apis ou Nosema ceranae, il est nécessaire de recourrir à la technique de la PCR (beaucoup utilisée par exemple pour diagnostiquer le COVID 19). Nous avons montré qu'il est possible de distinguer les deux espèces avec une autre méthode, la spectrométrie de masse MALDI, moins chère à l'unité que la PCR. De plus, le profil moléculaire recueilli nous indique si les spores sont viables ou non, ce qui donne une information complémentaire, que l'on a vérifiée par la technique de la cytométrie en flux (on compte les spores mortes, les spores vivantes et on en déduit un taux de viabilité). On a également mis en évidence des profils spécifiques pour des Nosema provenant de différentes zones géographiques. En associant ces technique, on commence donc à avoir une vision plus claire de l'infectiosité des spores.

Je vous propose ci-dessous l'abstract en anglais, également visible via le lien suivant :

https://www.researchgate.net/publication/344772872_MALDI_Biotyping_an_approach_for_deciphering_and_assessing_the_identity_of_the_honeybee_pathogen_Nosema

Matrix‐assisted laser desorption/ionization mass spectrometry biotyping, an approach for deciphering and assessing the identity of the honeybee pathogen Nosema

Camille Houdelet 

Michel Bocquet 

Philippe Bulet

First published: 15 October 2020

https://doi.org/10.1002/rcm.8980

Abstract

Rationale

The microsporidia are obligate intracellular pathogenic fungi that parasitize a wide range of invertebrate and vertebrate hosts and have important impacts on health, food security and the economy. In this paper, we focus on Nosema ceranae and N. apis, which chronically infect the digestive tract of honeybees, altering their physiology and lifespan.

Methods

We applied matrix‐assisted laser desorption/ionization mass spectrometry (MALDI‐MS) for rapid molecular profiling of extracts of Nosema spores in order to identify the species and the geographical origin, and assess the viability status of Nosema microsporidia in conjunction with a flow cytometric approach. Pure solutions of spores were prepared for flow cytometric analysis and MALDI‐MS profiling. A mechanical extraction of viable or heat‐killed Nosema spores was conducted to obtain mass fingerprints of peptides/proteins for samples of microsporidia from different geographical origins (MBO.NC01, MBO.NC02 and MBO.NA01).

Results

A distinction in the peptide/protein profiles between two isolates with different geographical origins was observed. Mass fingerprints of viable and experimentally killed spores were also clearly distinguishable, regardless of Nosema species. Finally, using our computational models on the different Nosema species, we were able to classify five independent isolates of Nosema microsporidia.

Conclusions

We have shown that MALDI‐MS is a rapid, cost‐effective and simple method for identifying Nosema species. We demonstrated that MALDI Biotyping could represent a valuable surveillance tool of nosemosis in apiaries for sanitary services and beekeepers.

Michel BOCQUET